Tinción de gram de cultivo kliguer

En esta práctica vamos a realizar la tinción de gram de un medio de cultivo kliguer cogiendo de éste E.coli.

Los materiales a utilizar serán los siguientes:

- papel de filtro

- agua destilada

- mechero de alcohol

- pinzas

- asa de siembra

- pipetas pasteur

- porta

- violeta de genciana

- etanol

- lugol

- safranina

- microscopio

- aceite de inmersión

 

Primero flameamos el asa de siembra para coger la muestra E. coli del kliguer, y lo llevamos al porta con una gota de agua destilada previamente echada, mezclamos bien, y secamos al calor del mechero con cuidado

       

Una vez seco, vamos a proceder a la tinción de gram:

1º impregnamos la muestra con violeta de genciana y dejamos actuar 1 min.

Después sin aclarar de agua destilada, aclaramos con lugol y lo impregnamos dejándolo actuar 1 min.

Luego aclaramos con agua y decoloramos con alcohol durante 30seg y hasta que el alcohol que caiga por el porta salga incoloro.

Lavamos con agua destilada y lo impregnamos con safranina dejándolo actuar 3 min.

Por último lavaremos con agua destilada y secaremos al calor del mechero o al aire libre.

             

Una vez seco lo observamos al microscopio al objetivo x100 con aceite de inmersión