En esta práctica vamos a realizar una tinción simple de E. coli sembrado en cultivo kliguer y sembrarlo en cultivo VRGB.
Los materiales a usar serán los siguientes:
- papel de filtro
- agua destilada
- mechero de alcohol
- pinzas
- asa de siembra
- E. coli en cultivo kliguer
- Azul de metileno
- portaobjetos
- pipetas pasteur
Primero cogemos una muestra del cultivo de kliguer con el asa de siembra previamente flameada. No tenemos que olvidar que el mechero de alcohol tiene que estar siempre encendido para crear ambiente aséptico. En un porta echamos una gota de agua destilada e impregnamos en esa gota el asa de siembra con el E.coli, cogemos el porta con las pinzas y secamos al calor del mechero con cuidado que no se queme.
Una vez seco, vamos a proceder a la tinción simple, impregnamos el porta de azul de metileno y dejamos actuar 1 min más-menos. Cuando pase citado tiempo, aclaramos con agua destilada y secamos al aire libre o al calor del mechero agarrando el porta con las pinzas
Una vez seco lo observamos al microscopio en objetivo x10, x40 y x100. Este último objetivo lo hacemos con aceite de inmersión.
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